分蘖洋葱(AlliumcepaL.Var.MultiplcansBai-ley)俗称毛葱,是黑龙江省传统的农家品种。其食疗价值很高,在东南亚市场需求量较大。但由于病毒的侵染,造成植株长势弱,矮化畸形,分蘖减少,葱头退化变小,致使产量和品质大幅度降低,给生产消费和出口创汇带来了严重障碍。
1分蘖洋葱病毒病病原种类初步鉴定
我省分蘖洋葱病毒病发生十分普遍。症状初期以花叶为主,成株期产生黄色褪绿条斑,尤以老叶明显,黄色条斑几乎覆盖整个叶面,且叶尖干枯;植株丛生矮缩,鳞茎变小,产量下降,品质变劣。人工接种鉴定发现,可被分蘖洋葱病毒系统感染的植物有洋葱、大葱、大蒜和蚕豆;局部感染的植物有千日红、苋色藜。通过叶片超薄切片的电镜观察,在叶肉细胞质中观察到大量的风轮状、束状、涡轮状内含体,叶绿体被破坏;利用大蒜复合病毒抗血清、洋葱黄矮病毒抗血清、韭葱黄条纹病毒抗血清进行ELISE测试,结果均呈阳性反应。以上鉴定结果表明,分蘖洋葱病毒病为复合侵染,已明确的病毒主要是洋葱黄矮病毒(Onionyellowdwarfvirus,OYDV)和韭葱黄条纹病毒(Leekyellowstripevirus,LYSV)。在电镜下观察到的病毒粒体均为线状,长度在300-1450nm之间,其中以550-800nm居多,直径11-12nm。如果将这些病毒粒体仅归入这两个种是不合适的,要明确侵染分蘖洋葱的全部病毒种类、确定其种属地位尚需进一步深入研究。
2影响分蘖洋葱病毒病发生严重程度的因素
2.1品种
经调查发现几乎所有的分蘖洋葱品种均可感病,但不同品种间病情指数有所不同。紫皮品种抗病性较强,黄皮品种病毒病发生普遍且严重。
2.2气候条件
在调查中观察到,一般情况下,生长期内气候炎热干旱,则病毒病发生早,病害扩展速度快,为害也比较严重。这可能是由于高温干旱时,蚜虫等传毒介体发生多,有利于病害的传播蔓延。笔者于2000年6月9日在宾县宾安镇调查时发现,该地区气候炎热,土壤干旱,蚜虫数量极多,结果植株发病严重,其病情指数为71.07,比阿城市、五常市分别高出8.94和21.2。
此外,病毒病的发生与栽培管理水平也有一定的关系。肥水充足,管理水平高,植株生长势强,则病毒病发生较轻;反之发生严重。
3分蘖洋葱病毒病综合防治措施
调查发现,分蘖洋葱播种以后,幼苗一出土就可显示出病症和高的发病率,说明分蘖洋葱病毒以鳞茎带毒为主,带毒鳞茎是最重要的初侵染源。长期无性繁殖、病毒逐年积累是病毒病发生严重的重要原因,在田间可通过机械损伤及蚜虫传播。在防治上可采取以下措施。
3.1利用组织培养技术培育无毒种苗
植物病毒很少进入生长点,利用0.2-0.5mm生长点结合热处理〔鳞茎于70℃处理10min(分)〕进行分生组织脱毒培养。以MS为基本培养基,添加蔗糖3%,琼脂0.8%,调pH至5.7-5.8,培养温度(22±1)℃,光照强度2000lX,光照时间13h?d-1。剥除鳞茎外皮,洗净后切除顶部2/3,于70℃温箱中热处理10min(分),用10%次氯酸钠溶液浸泡10min(分),无菌水冲洗3-4次,无菌滤纸吸干水分,在无菌条件下剥离0.2-0.5mm茎尖,接种到Ms+BA0.4mg?L-1+IAA0.1mg?L-1启始培养基上,40d(天)后,茎尖成芽率为100%,平均每个茎尖外植体分化不定芽3.1个,株高可达4.03cm;茎粗1.23mm。将茎尖外植体启始培养生成的幼芽进行切割,保留基部2cm切段,接种到1/2MS+IBA1.5mg?L-1+NAA0.01mg?L-1+PP3330.1mg?L-1生根培养基上,20d(天)后植株生根率为100%,根系发达,根毛多,地上部生长健壮,叶色浓绿,整齐一致。经电镜检测,试管苗脱毒率高达100%,将根系发达、生长健壮的试管苗移出培养室,打开封口膜,于18℃室温下炼苗5-7d(天),然后洗净根系附着的琼脂,移植到营养钵中。栽培基质为1/3草炭土、1/3大田土、1/3厩肥并添加少量过筛炉灰渣,浇足水后,置于温室中生长,成活率为100%。田间种植后植株生长势强,鳞茎明显增大。此外利用茎尖愈伤组织脱毒也获得成功,愈伤组织脱毒途径繁殖系数高,平均每块愈伤组织成苗数为10.2个,其繁殖系数明显高于茎尖分生组织脱毒培养,适于脱毒种苗的工厂化生产。
3.2加强田间管理
加强肥水管理,促进植株健壮生长,增强植株的抗病力。
3.3杀灭蚜虫
在生长期内定期喷施杀蚜农药,消灭传毒介体,可有效地减少病毒的扩散传播。
3.4选育抗病或耐病品种
抗病品种可以抵抗病毒侵入植株或对病毒产生过敏性反应和抑制病毒在植物体内繁殖,使病毒局限在少数组织内;耐病品种虽可以允许病毒在植株体内繁殖,但只能表现比较轻的症状或尽管表现症状较重但损失较少。调查研究发现,紫皮分蘖洋葱具有一定的抗性,可以作为培育抗病或耐病品种的材料。
目前,研究人员通过转基因技术,如外壳蛋白介导的抗性、反义RNA介导的抗性、卫星DNA介导的抗性、干扰运动蛋白等方法,在培育转基因抗病毒品种工作上取得了很大的成功。利用基因工程技术培育抗病毒的分蘖洋葱新品种是可能的。