胚胎移植是提高良种母畜繁殖力的有效措施,是发展奶牛生产,获得优质高产个体的一条快捷途径。
1 选择适宜的受体牛
应选择体型较大、性情温顺的个体。在实际生产中,改良牛较适宜,最好是西门塔尔杂交改良后代。从年龄上看,以3~6岁的经产母牛为最佳,10岁以上的老龄牛不能选用。初产牛必须达到性成熟以后,年龄应在16个月龄以上,体重达成年体重的75%的个体方可选用。要求受体牛是健康、没有疾病的个体、尤其是生殖系统的疾病。对于过肥或过瘦、卵巢发育不良、生殖器官有炎症、人工授精不受孕的母牛,都不宜做受体牛。
2 在发情阶段适时移植
母牛不发情,就不能排卵形成黄体,也不能进行胚胎移植。在第1次同期发情处理时,我们采用间隔10 d 2次PG注射,由于某些母牛产后没有发情,结果进行注射的75头母牛中,只有33头发情,同期发情率仅为44%,效果欠佳。因此,发情周期不正常的受体牛,不适宜做胚胎移植。
3 短期优势饲养
在移植前6~8周,受体牛要进行科学补饲,使机体达到最佳繁殖状态。每天补饲精料2.5 kg,所补饲的精料要求营养丰富、品质优良,同时,还应注意维生素A、D、E和微量元素及矿物质饲料的供给。
4 注意环境条件及物品消毒
胚胎操作室要求干净、无灰尘、无异味,因此,最好在移植前进行紫外线消毒,所有器械、用品需经严格消毒处理、摆放井然有序,便于使用。工作人员的手臂,在操作前要用酒精棉消毒。
5 做好受体牛的发情观察
发情观察在胚胎移植工作中非常重要,是确定移植时间的依据。非手术法胚胎移植是在发情后第7 d进行,起零时间应从适合做人工输精时算起。发情观察要定人、定时,而且观察人员要有丰富的经验。每天分早、上午、下午及晚4次观察,每次1 h,准确记录每头母牛发情表现及时间。
6 黄体检查
在移植前,对受体牛要进行直检,确定黄体发育情况。好的黄体凸出卵巢表面、质地柔软、有弹性、直径达1 cm以上,底部充实。个别牛卵巢偏小,所形成的黄体没有达到要求那么大、但质地的弹性和柔软程度都很好,这样的牛也可进行胚胎移植,并且能获得理想的受胎率。在检查时,检查动作要轻,不要用力挤压,以免弄伤受体牛。
7 胚胎操作应严格按程序进行
甘油冷冻胚胎的操作程序为:解冻→解冻液→移植液→装管→装枪,而乙二醇冷冻胚胎解冻后直接装枪,不需要其他操作程序。在第1次同期发情处理胚胎移植时,为检查胚胎质量,将乙二醇冷冻胚胎解冻后移植到移植液中镜检、装管、装枪,结果移植的12头牛全部空怀。
8 麻醉剂量适当
麻醉的目的,一是为了减轻移植时对受体牛刺激,使其安稳,二是防止直肠努责,便于操作。麻醉采取尾椎麻醉方式,如果麻醉部位靠后或剂量不足,直肠努责得不到抑制;如果剂量过大,使直肠扩约肌过度松驰,在体内形成大的管状空腔,有的后肢麻痹站不起来,给移植带来不便,甚至无法移植。
9 要熟练掌握胚胎移植操作技术
胚胎移植是将早期胚胎移植到生理状态相同的受体牛体内,使之继续发育。一般是发育第7 d的胚胎,第7 d进行移植。移植部位是黄体发育较好一侧子宫角的上二分之一至下三分之一,如有可能则越深越好。要求操作人员要在短时间内将胚胎移植到位,原则不超过10 min。同时要注意两手的协调性,避免在移植的过程中擦破子宫内膜。
10 胚胎质量要有保证
胚胎质量是决定移植是否成功的重要因素之一,只有好的胚胎才能获得较高受胎率。实践中,移植的胚胎质量须达到B级以上,C级胚胎不能单独移植,D级属于死亡或没有利用价值的胚胎。冷冻胚胎要选择A级胚胎,因为胚胎在冷冻过程中,质量有所下降。我们在引进乙二醇冷冻胚胎移植时,只有A级受孕,B级无1例受胎。
11 要选择适宜的移植季节和时间
胚胎移植要避开酷暑和严寒的影响,最佳移植季节是每年的3~5月份和10~11月份。在高温季节进行移植,应选择早、晚天气凉爽的时候。7月17日~9月24日,对6头自然发情母牛在早8时前和晚18时后进行7次胚胎移植,有3头母牛受孕,效果良好。
12 为提高群体受胎率,可重复移植
据资料介绍,受体牛可连续进行2次胚胎移植,2次移植没有成功、不可再做受体牛。我们对12头受体牛进行重复移植试验,第2次移植有5头母牛受孕,受胎率为41.7%。又从中选择2头进行第3次移植,结果1头母牛受孕。