瘤胃微生物脲酶抑制剂质量标准
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    本标准适用于化学合成法制得的瘤胃微生物脲酶抑制剂,在饲料工业中作为反刍动物饲料添加剂。
    1、 外观和性状
  本品为白色或淡黄色粉末,易溶解于水,在乙醇或乙醚中易溶解。
    2、项目和指标

         项  目                     指  标

    脲酶抑制剂纯度,%≥                80%
         酸度,pH                     3-6
       干燥失重,%≤                    5
       炽灼残渣,%≤                    5

    3、脲酶抑制剂纯度测定方法
  所使用的水为蒸馏水。  
  3.1 溶液的配制
  3.1.1 含2%FeCl3 的0.1mol/L的HCl溶液
  首先量取9ml HCl,置于1000ml容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀即为0.1mol/L HCL溶液;按重量体积比 称取氯化铁20克,溶于1000ml 0.1mol/L 的HCL溶液中,即配成含2% FeCl3 的0.1mol/L的HCl溶液。
  3.1.2  10%的三氯乙酸
  称取10g三氯乙酸,用水定容至100ml,即为10%的三氯乙酸。
  3.1.3 标准溶液的配置
  准确称取1.0000g脲酶抑制剂标准品,用水定容至1000ml,配成1mg/L溶液,从中分别量取10ml、5ml、2.5ml、2ml、1ml、0.5ml、和0ml,用水分别定容至100ml,配制成标准浓度梯度为每毫升含AHA 0.1000mg、0.0500mg、0.0250mg、0.0200mg、0.0100mg、0.0050mg、0.0000mg。
  3.1.4 待测样品溶液的配制
 称取0.5-1g (精确至0.0001g)的待测样品放入1000ml的容量瓶中,用水定容至刻度,从中取10ml,放入100ml的容量瓶中,用水定容至刻度,使待测样品中AHA的含量在每毫升含0.05mg和0.1mg之间。
  3.2 仪器与设备
  3.2.1 高速离心机
  离心力能够达到12800xg。
  3.2.2 分光光度计
  用500nm波长可见光比色。
  3.3 测定方法
  取2ml的标准溶液或待测样品溶液,用10%的三氯乙酸稀释到10ml,静置20min,然后在12800xg离心15min,取2ml上清液,加入1ml蒸馏水和1ml含2%FeCl3 的0.1mol/L的HCl溶液。将该溶液混匀,当出现葡萄酒红色时立即在500nm下比色,从加入FeCl3 开始,这种红色能够稳定20min。参比溶液的配制方法相同,只是用2ml水取代2ml的待测样品,在比色过程中用每次都用参比溶液调节满度和零点。
  3.4 公式与计算
  脲酶抑制剂纯度(%)=A*V*100/(m*1000)=A*1000/m
  式中:
    A=对应标准曲线吸光值查得的样品质量,mg/ml;
    m=称取样品的质量,g
    V=待测样品稀释的总体积=1000*10=10000ml

    4、脲酶抑制剂酸度测定方法
  称取0.0751gAHA,放入100ml容量瓶内,用蒸馏水定容至刻度。从中取1ml放入100ml容量瓶内,用蒸馏水定容至刻度,混合均匀即配制成0.1mol/L溶液,用吸管吸取数滴滴在广泛pH试纸(1-14)上,用标准比色板对比pH。

    5、脲酶抑制剂干燥失重测定方法
    取脲酶抑制剂样品,混合均匀,称取1g共3份,放入预先在60℃烘干10小时至恒重并称取的扁形称量瓶中,然后将盖半开,在60℃烘干10小时至恒重。取出时将盖盖好,置于干燥器中冷却至室温,然后称重,从取样量和减失的重量计算干燥失重。

    6、脲酶抑制剂炽灼残渣测定的方法
  取脲酶抑制剂1g,置于炽灼至恒重的坩埚中,精确称重,缓缓炽灼至完全炭化,放冷,加硫酸0.5ml使其湿润,低温加热至硫酸蒸汽除尽后,在550℃炽灼至完全炭化,放冷,精确称重后,在550℃炽灼至恒重即可。

    7、脲酶抑制剂的用量和使用方法
  7.1 用量
  每天每头肉牛饲喂AHA50-150毫克,或每千克日粮干物质含AHA5-25mg;每天每头奶牛饲喂AHA50-150毫克,或每千克日粮干物质含AHA5-30mg;每天每只羊饲喂AHA10-50毫克,或每千克日粮干物质含AHA5-30mg。
  7.2 使用方法
  按照对不同反刍动物的用量,将AHA用载体均匀稀释,可配制成为预混料、浓缩料或配合饲料,然后使用。

    8、贮存条件和贮存期
  用密封防潮包装贮存,贮存有效期为18个月。

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