1主题内容与适用范围

　　本标准规定了用硫氰酸铁－亚硝酸催化动力学分光光度法测定碘的方法。

　　本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中碘的测定，随所用试剂浓度的不同，试样测定液的浓度范围分别为0.02～0.24μg／mL和0.004～0.02μg／mL（以Ⅰ计）。

2引用标准

　　GB1.4标准化工作导则化学分析方法标准编写规定

　　GB6682实验室用水规格

　　GB9721化学试剂分子吸收分光光度法通则（紫外和可见光部分）

3方法原理

　　用碳酸钾固定试料中的碘，经干灰化破坏有机物，使碘游离出来。碘离子在有适量亚硝酸存在的稀硝酸溶液中，能催化硫氰酸铁褪色。在一定范围内，硫氰酸铁的褪色速度与碘离子浓度呈线性关系，可用于碘的分光光度法测定。

4试剂

　　所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB6682中三级水的规格。

4.1硝酸GB626

4.2碳酸钾溶液

4.2.1碳酸钾溶液（300g／L）

　　称取30g无水碳酸钾，溶于水，稀释至100mL。

4.2.2碳酸钾溶液（30g／L）

　　称取3g无水碳酸钾，溶于水，稀释至100mL。

4.3硫酸锌溶液（100g／L）

　　称取10g硫酸锌（ZnSO4?7H2O）溶于水，稀释至100mL。

4.4硫氰酸钾溶液

4.4.1硫氰酸钾溶液〔c（KCNS）＝0.1mol／L〕

　　称取0.97g硫氰酸钾，溶于适量水，移入100mL容量瓶，稀释至刻度。

4.4.2硫氰酸钾溶液〔c（KCNS）＝0.0024mol／L〕

　　吸取0.1mol／L硫氰酸钾溶液（4.4.1）2.4mL，移入100mL容量瓶，稀释至刻度。

4.5硫酸铁铵－硝酸溶液

4.5.1硫酸铁铵－硝酸溶液〔c（NH4Fe（SO4）2?12H2O）＝0.124mol／L〕。

　　称取6.0g硫酸铁铵〔NH4Fe（SO4）2?12H2O）〕溶于水，慢慢加入硝酸（4.1）47mL，移入100mL容量瓶中，稀释至刻度，此溶液当天配制。

4.5.2硫酸铁铵－硝酸溶液〔c（NH4Fe（SO4）2?12H2O）＝0.16mol／L〕。

　　称取7.7g硫酸铁铵〔（NH4Fe（SO4）2?12H2O）〕溶于水，慢慢加入硝酸（4.1）16.7mL，移入100mL容量瓶中，稀释至刻度，此溶液当天配制。

4.6亚硝酸钠溶液（20.7g／L）

　　称取2.07g亚硝酸钠溶于水，稀释至100mL，此溶液当天配制。

4.7硫氰酸钾－亚硝酸钠溶液

　　称取0.0483g亚硝酸钠溶于水，加入0.1mol／L硫氰酸钾溶液（4.4.1）5mL，稀释至100mL，此溶液当天配制。

4.8碘标准贮备溶液（1mL溶液含有1mgⅠ）。

　　称取0.1308g经120℃干燥2h、于干燥器中冷却的碘化钾溶于水，移入100mL容量瓶中，稀释至刻度，贮存于棕色瓶中，可贮存三个月。

4.9碘标准中间溶液（1mL溶液含有10μgⅠ）。

　　吸取4.8溶液5mL，移入500mL容量瓶，稀释至刻度，贮存于棕色瓶中。

4.10碘标准工作溶液

4.10.1碘标准工作溶液（1mL溶液含有2μgⅠ）

　　吸取4.9溶液20mL，移入100mL容量瓶，稀释至刻度，贮存于棕色瓶中，使用期为一周。

4.10.2碘标准工作溶液（1mL溶液含有0.2μgⅠ）

　　吸取4.9溶液2mL，移入100mL容量瓶，稀释至刻度，贮存于棕色瓶中，使用期为一周。

5仪器、设备

5.1实验室常用仪器

5.2分光光度计

5.3坩埚：镍质30mL

5.4秒表

6试样的制备

　　采集具有代表性的样品至少2kg，用四分法缩减至250g粉碎过40目筛，混匀装入样品瓶内，密闭，备用。

7分析步骤

7.1试料处理

　　称取0.5000～1.0000g试样（精确至0.0001g）置于镍坩埚中，加碳酸钾溶液（4.2.1）1mL和硫酸锌溶液（4.3）1mL，用小玻璃棒将混合物搅成糊状（务必使试料充分湿润，如液体不够，可加少量水），玻璃棒上的残留物，用洗瓶洗入坩埚，将坩埚置于95℃烘箱中烘干，再在电炉上慢慢炭化，在炭化充分完全以后，加盖放入已加热到300℃的高温炉中，升温到500℃，保持1.5h后，取出坩埚，冷却后加少量水，将灼烧残渣研碎，移到电炉上加热至微沸，过滤坩埚中内容物，多次用热水洗涤滤渣，将滤液和洗液收集到50mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，此液待测。

7.2碘含量＞3mg／kg试样的测定

7.2.1试料测定步骤

　　吸取7.1所得试料液VmL（V中含碘＜1.2μg，V≤5mL）入10mL容量瓶，加碳酸钾溶液（4.2.2）（5－V）×0.8／5mL，用水补足到5mL，加硫氰酸钾－亚硝酸钠溶液（4.7）0.5mL，摇匀，再加0.124mol／L硫酸铁铵－硝酸溶液（4.5.1）1mL，同时用秒表记时，并充分摇匀，放置于室温下反应，室温在20～30℃时，放置20min；15～20℃时，放置25min；低于15℃时，放置40min。用1cm比色池，在460nm波长处，以蒸馏水为参比测吸光度，在工作曲线上查得试料液V中的碘含量。

7.2.2工作曲线的绘制

　　吸取碘标准工作液（4.10.1）0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50，0.60mL分别入10mL容量瓶。
各加碳酸钾溶液（4.2.2）0.8mL，用蒸馏水补足到5mL，以下按7.2.1中加硫氰酸钾－亚硝酸钠溶液（4.7）0.5mL以后的操作进行，每间隔1min的时间向每份标液加0.124mol／L硫酸铁铵－硝酸溶液，到反应时间后，再以1min的间隔时间测各标液的吸光度，绘制工作曲线。

7.3碘含量≤3mg／kg试样的测定

7.3.1试料测定步骤

　　吸取7.1所得试料液VmL（V中碘含量＜0.1μg，V≤5mL＝入10mL容量瓶，加碳酸钾溶液（4.2.2）（5－V）×0.8／5mL，用水补足到5mL，加硫氰酸钾溶液（4.2.2）1mL硫酸铁铵－硝酸溶液（4.5.2）2mL，摇匀，再加亚硝酸钠溶液（4.6）1mL，同时用秒表计时，并充分摇匀，放置于室温下反应，室温25～30℃，放置15min；室温20～25℃时，放置20min；室温15～20℃时，放置25min；低于15℃，放置40min。用1cm比色池，在460nm波长处，以蒸馏水为参比测吸光度，在工作曲线上查得试料液V（mL）中的碘含量。

7.3.2工作曲线的绘制
　
　　吸取碘标准工作液（4.10.2）0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mL入10mL容量瓶，各加碳酸钾溶液（4.2.2）0.8mL，用蒸馏水补足到5mL，以下按7.3.1中加硫氰酸钾溶液（4.4.2）1mL以后的操作进行，每间隔1min的时间向每份标液分别加亚硝酸钠溶液，到反应时间后，再以1min的间隔时间测各标液的吸光度，绘制工作曲线。

注：7.3也适用于碘含量＞3mg／kg试样中碘的测定，将试料液稀释后按7.3进行。

8分析结果的表述

　　碘的含量（mg／kg）按下式计算：

　　I（mg／kg）＝V0×m1／（V×m0）

　　式中：V0--试料液总体积，mL；

　　V--测定时所取试料液体积，mL；

　　m1--由工作曲线上查得V中的碘含量，μg；

　　m0--试料的质量，g。

　　所得结果表示到0.01mg／kg。

9允许差

　　每个试样称取两份试料进行测定，取其平均值表示结果，分析结果的相对偏差不大于以下所列的数值。

　　碘含量（mg／kg）＞3.00mg／kg，相对偏差30％；

　　碘含量（mg／kg）≤3.00mg／kg，相对偏差50％。