淀粉作为反刍动物精饲料的主要能量物质,因具有易于被反刍动物消化吸收,提高日粮的能量浓度,且利用效率较高的特点,故受到国内研究者的广泛关注。谷物类饲料一般富含淀粉,Herrera-Saldena.R.E.,Cone.J.W.,Philippeau.C.等国外学者研究过部分谷物饲料淀粉在瘤胃内的降解率,取得了一些数据;国内学者对谷物饲料淀粉在瘤胃内降解的研究很不够,基于这点采用尼龙袋法测定7种常用的谷物饲料淀粉在瘤胃内的降解率,旨在建立常用谷物饲料淀粉降解率数据库,为反刍动物精料补充料的合理配制提供技术参数。
材料与方法
1.1试验动物
选用6头健康生长期浏阳黑公山羊(10±0.5kg),去势,消毒,单笼饲养,待适应日粮后安装永久性瘤胃瘘管。
1.2试验原料及原料处理
谷物类饲料:玉米、小麦、大麦、荞麦、大米、小米和高粱,将谷物类饲料置于60~65℃的恒温干燥箱中烘8~12h后,经粉碎机粉碎过1mm筛以保证颗粒细度,装袋标号备用。其营养成分见表1。
表17种谷物饲料营养成分表(干物质基础)(%)
样名
淀粉
干物质
有机物
粗蛋白
粗脂肪
大麦
小麦
玉米
荞麦
高梁
大米
小米
1.3试验基础日粮
试验基础日粮参照10kg左右中国青山羊的营养需要及饲养标准,能量按1.3倍维持需要配制。基础日粮组成及营养水平见表2。
表2试验基础日粮的组成及营养水平(%干物质)
成分
配比(%)
营养指标
含量
玉米
ME(Mcal/kg)
麦麸
豆粕
UDP(%)
菜籽饼
尿素
NDF(%)
食盐
ADF(%)
预混料
玉米秸
总计
1.4饲养管理
试验羊单笼饲养,每日两次分别07:00和18:00饲喂等量日粮,先喂精料后喂粗料,精粗比为1:1,自由饮水。试验开始前于晨饲前空腹称重,预饲期7d,正饲期2d。
1.5试验方案
选取体重相近、健康状况良好的带瘤胃瘘管的去势浏阳黑山羊6只,随机分成2组,每组3只羊,分批次测定大麦、大米、高粱、荞麦、小麦、小米、玉米等7种谷物饲料淀粉在瘤胃内的动态降解率。本试验设
定7个时间点:0,2,4,8,12,24,36h,每头羊每个时间点设有2个重复尼龙袋。选择孔径为420目的尼龙布裁成15cm×10cm,对折,用塑料缝包机压双道,制成长×宽为10cm×7cm的尼龙袋。称取5g左右饲料装入尼龙袋内,用塑料缝包机压至密封,标号。将装12个小尼龙袋的尼龙网袋于晨饲后1h一次性放入每只羊的瘤胃中(0时间点的尼龙袋不放入)。尼龙网袋的口子用尼龙线缩紧并挂在瘘管塞上。在每个时间点用钳子从每只羊的瘤胃中取出两个平行尼龙袋,并记录相应的尼龙袋号码,将取出的尼龙袋立即在中速自来水下冲洗干净,然后放入冰箱中冷藏,直至所有尼龙袋都取出来为止。将取出的所有尼龙袋连同0时间点的尼龙袋全部放入洗衣机内,在标准状态下洗涤,洗至水清亮为止。将洗后的尼龙袋置于65℃烘箱中烘干,然后测定原样和不同时间点水洗样中淀粉的含量。饲料中淀粉动态降解率操作程序见表3。
表3饲料中淀粉动态降解率操作程序
项目
日粮精粗比:1:1
饲养水平:1.3倍维持饲养水平
饲喂次数:2
样本粉碎粒度:1.0mm
试验动物数量:3
试验天数:2d
平行袋数量:2
取样程序:全部放入/逐渐取出
培养时间:0,2,4,8,12,24,36h
1.6淀粉的测定
利用热稳定淀粉酶(Thermostable-Amylase)将淀粉水解为双糖,然后用淀粉葡萄糖苷酶(Amyloglucosidase,AmG)水解为葡萄糖,在BeckmanSynchronCX4/Pro全自动生化分析仪上通过测定葡萄糖的含量来计算淀粉的含量。
其计算公式为:
总淀粉含量=G×(100/W)×0.9×100%
注:公式中G为水解样中葡萄糖含量(mg/mL),W为样品干物质重量(mg),0.9为淀粉与葡萄糖的转换
结果计算与数据统计
2.1每时间点淀粉的降解率的计算
淀粉在不同时间点的降解率(dp)%依下式计算:
(dp)%=[(放入时袋中饲料淀粉重-某时间点残留袋内的饲料淀粉重)/放入时袋中饲料干物质(淀粉)重]×100
2.2淀粉有效降解率(P)
根据Arskov和McDonald提出的公式计算:
R(t)=U+D×e-kd(t)和P=S+(D×kd)/(kd+kp)
式中:R(t)-某一时间点的剩余率,U-淀粉中不可降解的部分(理论上认为这一值为零),D-淀粉中慢速降解的部分(理论上认为D=100-S,S为快速降解部分)Kd-D的降解速率常数。
数据处理采用SAS(SASforWindows,Release6.12)软件包进行统计分析。
试验结果与分析
本试验采用瘤胃尼龙袋法,根据Arskov和McDonald提出的饲料营养物质瘤胃降解模型得出了7种常用谷物饲料淀粉降解模型参数和降解率,见表4。从表4可见:7种谷物饲料淀粉的有效降解率从大到小依次为大麦小麦玉米大米荞麦高粱小米,分别为97.05%、96.28%、55.37%、45.23%、44.10%、42.58%、36.43%;随着样品在瘤胃中培养时间的延长,不同样品的淀粉消失率随之提高。对于同种饲料,不同品种饲料中的总淀粉含量不同,并且其所含淀粉的物理、化学特性也不同,这些都是影响淀粉在瘤胃降解的主要因素。此试验部分结果与Herrera-Saldana等用瘤胃尼袋法测定出的五种谷物淀粉的瘤胃降解率结果有差异,这可能与饲料的不同品种有关。本试验中玉米的淀粉降解率为55.37%,这与齐智利在所做的结果一致,与任莹的结果相近。
降解模型参数
小麦
结论
本试验用瘤胃尼龙袋测定7种常用谷物类饲料淀粉的瘤胃降解率,结果表明:7种常用谷物类饲料中以大麦的淀粉有效降解率最高,依次是小麦、玉米、大米、荞麦、高粱,小米的淀粉有效降解率最低。