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两个来自不同担孢子，可亲合的初生菌丝细胞壁接触，并融合，形成双核的次生菌丝，次生菌丝中的每个细胞中都有两个分别来自两个亲代的细胞核，每个细胞的隔膜外侧都有一个扣状的锁状联合。锁状联合是双核的次生菌丝所特有的形态标志。

次生菌丝的生活力大大强于初生菌丝，分解基质的能力大大增强，生长也较快，在适宜的营养和环境条件下，可无限生长。次生菌丝阶段占食用菌生活史的大部分时间。