葡萄组织培养育苗的程序—初代繁殖
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①获得无菌原种苗。一般采用综合无伤灭菌法获得。其具体操作是:将葡萄插条放在培养室内砂箱中萌发,待抽梢5节以上时,或对田间顶部嫩梢,按无菌操作剪取嫩梢,去除大叶放入瓶中。在超净工作台上,先用无菌水浸泡冲洗1次,加入01%升汞液浸没外植体,并剧烈摇动数次,灭菌5~8分钟后,倒去升汞液,再用无菌水冲洗4次。用无菌剪刀剪成单芽茎段,插于培养基上,每瓶接种1个茎段。1周后检查,若不污染,则可获得无菌材料。

②无菌原种苗初代繁殖的特点。

由于受到灭菌药剂的影响,其生长特点有4个方面:一是初代生长和繁殖一般较慢;二是初代生长与取材部位有关,一般随着剪取单芽节位的上移,死亡数有所降低,生根率则有所增加。以顶芽及上部3~4节的茎段比较好;三是初代生长表现出成年特性。试管苗继代培养的枝条呈现幼年形态特征,无卷须。而从成年树上取的芽,初代培养则有卷须;四是初代培养特性与品种密切相关。不同品种初代和继代差异不同,京早晶、里查马特差异小,先锋、藤稔、高墨等差异大。

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