影响葡萄试管苗繁殖的因素
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①品种。不同种、品种及品系对培养基和培养条件有不同的要求,已有许多报道。曹孜义等用GS系列培养基对40多个品种进行的大量实验证明,绝大多数品种都能进行试管繁殖,每月平均增殖倍数24~82倍,仅401巨峰×希姆劳德品种未获成功。

②继代次数。有些报道认为,试管快速繁殖随继代次数和继代时间的增多,繁殖速度有下降的趋势,甚至会丧失分化再生能力。甘肃农业大学10多年的实验证明,以芽增殖芽和以苗增殖苗的途径,未发现葡萄试管繁殖速度有随继代时间而降低的现象。如有的品种(乍娜、选拔巨峰、藤稔)已离体繁殖6~8年,繁殖代数已达48~120代,其增殖倍数未见降低,仅发现移栽成活率有下降现象。鉴于此,他们建议,试管繁殖代数超过5年的,应从优株上采取新芽,重新获取无菌苗较妥。

③培养基成分。培养基成分适宜与否,对葡萄繁殖影响极大。培养基和培养条件适宜时,试管苗的根和芽同时生长,一次成苗。转接后,一般在3天后单芽茎段基部产生愈伤组织,7~10天后发根,10~15天抽茎,1个月后可长成具有3~8条根和4~5片新叶的小苗。若培养基不适宜,茎段基部会长出大量愈伤组织,抑制发根和抽茎,或根过大过多,影响上部生长,或上部生长而下部不发根,或二者均不生长,褐化死亡。

基本培养基:据报道,用GS培养基比MS培养基好,增殖倍数依品种而异,每月24~82倍。

据张鉴铭(1985)报道,昆玉葡萄使用MS培养基不成功,用B5效果也差,换用GS效果较好。

曹孜义等提出的GS培养基,不仅成本低而且对绝大多数品种均可达到每月有3倍左右的增殖倍数。陈光泽等(1987)比较MS、B5、N6、Nitche、White基本培养基对山葡萄繁殖速度的影响后认为,改良MS和改良B5为最好。

有机成分:培养基有机成分中,肌醇用量较大,在MS、B5等培养基中每升加入100?mg,而在C2D、GS培养基配方中却大量减少,以防葡萄组织褐化。适当降低培养基的肌醇用量,对绝大多数葡萄品种增殖都有良好作用。

激素:6苄基腺嘌呤(BA)能促进葡萄不定胚的分化和茎尖丛生芽的形成,一般每升加入05~40?mg,但当分化成芽或形成胚状体后,萌发、增长时则要降低浓度至02~05?mg/L。对于要求根、芽同时生长的绝大多数品种不需要BA,少数品种仅需要002?mg/L的低浓度即可。

如果超过01?mg/L就会抑制发根,超过05?mg/L则完全不发根。在茎尖培养、芽增殖和根茎同时生长时常用05~10?mg/L吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA),用量一般为01~05?mg/L。

细胞激动素(KT)促进细胞分裂的作用比BA弱,在茎尖培养中有时与BA配合使用,也有不用或单独使用的。

④培养条件。影响葡萄繁殖速度的培养条件有光强度、温度和容器。一般用2 000~3 000 lx日光灯,培养温度为25~30℃,用较大的三角瓶或小的果酱瓶。

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