菠萝离体快繁程序,可以采用一次诱导丛生不定芽,再经继代培养获得绿苗,或者通过诱导产生愈伤组织,再分化成绿苗的程序。前者育苗时间短,繁殖速度快,且遗传性比较稳定,其主要的生产流程为:
外植体表面消毒→接种→诱导丛生不定芽→丛芽继代培养→丛芽壮苗培养→单苗培养→一级苗圃假植→二级苗圃假植→大田定植
1.外植体的消毒和接种 选取冠芽苗、吸芽苗或裔芽苗的茎尖,先用70%酒精浸30秒钟,然后用0.1%升汞消毒10~15分钟,再经无菌水冲洗3~4遍,将原切口切除部分后即可接种。
2.初代培养 将消毒后的茎尖接种于MS+BA1.0毫克/升+NAA2.0毫克/升+2,4-D1.0毫克/升+3%蔗糖或MS+BA2.0毫克/升+NAA1.0毫克/升+2,4—D2.0毫克/升+3%蔗糖的培养基上培养,待芽萌动生长后便可转至丛芽增殖的培养基上。
3.丛芽的增殖和继代 增殖培养基可用MS 0.5毫克/升+BA、KT、NAA和IAA各1.0毫克/升的培养基。芽丛数量多在培养30~60天时明显增多,一般每代增殖培养时间以60天为宜。
4.壮苗培养 为了诱导生根和壮苗,将丛生小苗转至1/2MS+IBA1~3.0毫克/升+NAA0.5毫克/升或1/2MS+IBA1~2.0毫克/升+KT0.3毫克/升的培养基上培养,待苗长出4~5片叶,高达5厘米以上时使可假植。
5.组织培养苗的移栽 菠萝组织培养苗的移栽方法具体的可参考香蕉移栽法,为了提高成活率,应遵循以下的原则:培育壮苗,组培苗在移栽前半个月左右,可置于室内自然光下培养,以利于培养壮苗;适时移栽,以广西南宁地区为例,3~10月均可进行组培苗移栽,以白天气温为20~35℃的4~9月成活率最高,气温低的季节不适宜移栽;选用通透性和保水性好的植苗基质;掌握好肥水管理,做好遮荫防晒等。