猪流行性感冒可根据流行病学特点,结合临诊症状及病理变化综合分析,可以做出初步诊断。确认需进行实验室检验。
1、病毒分离鉴定
从活体内分离病毒的样本是鼻粘膜拭子,在发热期采样较易分离到病毒,采集的拭子应放入适宜的运输培养液中(如甘油生理盐水、磷酸缓冲液等),低温(4℃)保存并尽快送往实验室。病死猪可取肺、淋巴结等制成悬液。样品经无菌处理后接种9~11天龄无特定病原体动物鸡胚或非免疫鸡胚并置于33~35℃孵育,弃除24小时内死亡的鸡胚,并于48~72小时收集鸡尿囊液并作HI试验,证明是否有流感病毒存在。如第一代鸡胚分离物HI阴性,则再盲传几代。然后再进行HA试验和NA抑制试验以确定SIV的HA和NA亚型。
2、血清学试验
需用双份血清样本。一份在急性发病期采集,另一份在3~4周后采集。常用方法为血凝抑制试验。若恢复期血清比急性期血清的抗体滴度增加4倍以上时,即可做出诊断。诊断时应注意血清中可能存在的非特异性血凝抑制因子和非特异性血凝素,以避免出现错误的结果。也可应用酶联免疫吸附试验检测,美国IDEXX公司已有猪流感酶联免疫吸附试试剂盒供应。此外,中和试验、琼指扩散试验、免疫荧光试验、聚合酶链式反应、核酸探针等试验也可用于本病的诊断。