典型病变和重要症状可作为怀疑本病的参考,确诊应进行实验室检查。
(1)病原学检查
①病料采集:死于炭疽的动物尸体,原则上禁止剖检。患病动物生前于濒死期采集耳静脉血液、水肿液或血便;死后可立即于四肢末梢采集静脉血液,也可切取一耳朵;必要时做腹部局部切口,采集小块脾脏,然后将切口用0.2%升汞或5%石炭酸浸透的棉花或纱布塞好,以防污染环境。
②染色镜检:血液涂片或组织涂片用瑞特氏法或美蓝法染色镜检,若发现带有荚膜的单个、成双或短链的菌端平直的杆菌,链状菌体宛若竹节状,结合临床表现,可做出诊断。
③分离培养、鉴定:采集新鲜血液、水肿液和组织病料,直接用于分离培养。如病料为毛发、骨粉等污染材料,70℃加热30min杀灭杂菌后再进行分离培养。病料接种于普通琼脂或鲜血琼脂平板,37℃培养,挑选可疑菌落进行荚膜及运动力测定,必要时进行串珠试验和Y噬菌体试验以对其作出鉴定。
④动物接种试验:用培养物或病料悬液,皮下接种豚鼠或小鼠数只,接种动物一般于1-2d死亡,取病料染色镜检、分离培养,可作出判断。
(2)免疫学试验
炭疽沉淀试验(Ascoli氏反应)是诊断炭疽简便而快速的方法,但炭疽杆菌与蜡样芽孢杆菌等近缘菌有共同抗原,结果判定时须注意。此外,荧光抗体技术、琼脂扩散试验、间接血凝试验等也可用于炭疽病的诊断。
牛炭疽与牛出血性败血病、牛气肿疽、羊炭疽与羊巴氏杆菌病、恶性水肿等疾病在症状、病变方面相似,应注意鉴别。