2002年9月中旬,临沂市兰山区某养韶专业户饲养的179只幼貂和58只成貂发生一种以发热、呕吐、呼吸困难、下痢、神经症状及最后衰竭死亡为主的传染病,总发病率为67.9%,发病期间共死亡71只,死亡率占发病的44%,造成巨大的经济损失。根据临床症状、剖检变化和实验室诊断等手段,确诊为水貂弓形虫病与犬瘟热病混合感染,并采取中西结合、综合防治措施,使病情得到控制,现将诊治情况报告如下。
1 临床症状
发病水貂较多,症状各有不同,大体表现如下:病初,多数病貂体温升高至40~42℃,精神沉郁,食欲减退;有的病貂呼吸困难,从鼻孔和眼内流出粘液;有的出现拒食、呕吐,排水样或血样粪便;有的出现神经症状,表现为中枢神经功能紊乱,兴奋性增高,不安或沉郁状态,肌肉痉挛、昏迷、抽搐、转圈、运动失调而呈醉酒样等症状,最后衰竭死亡;幼貂出现突然视觉消逝,瞳孔高度散大,虹膜呈绿色变化;病程长短不一,1~10天不等。
2 剖检变化
我们对死亡的7例进行了剖检,其主要病理变化为:尸体消瘦,被毛常被粪便污染,皮肤无弹性;心肌迟缓,心内、外膜有出血斑点;肝脏肿大,充血、瘀血,有的表面布满点状坏死区;气管粘膜有出血点;肺充血、水肿;肾脏肿大,被膜下有出血斑点;膀胱粘膜有点状或条纹状出血点;脑膜血管充血、水肿,有的脑实质水肿;全身淋巴结肿大,有的充血、水肿;胃、小肠粘膜充血、出血,胃底部发生溃疡,肠腔内常有大量的血液和粘液等病变。
3 实验室检验
3.1 细苗培养 无菌取新鲜病死水貂的肝脏、脾脏、心血、淋巴结等组织,分别接种于普通琼脂培养基上,置37℃的恒温箱中培养24小时,结果无细菌生长,说明本次疾病为非细菌性感染引起。
3.2 弓形虫的实验室检验
3.2.1 内脏组织涂片检验 取新鲜病死水貂的肝脏、肺脏、脾脏、淋巴结等病料分别涂片、自然干燥后,甲醇固定10分钟,姬姆萨染色、干燥后镜检。发现有数量不等的一端稍尖,另一端钝圆,呈香蕉形或弓形的滋养体,虫体胞浆呈淡蓝色,核呈紫红色,位于虫体中部偏向钝圆的一端,每个视野中有单个、成双或多个虫体存在。
3.2.2 动物实验 取新鲜病死水貂的肝脏、肺脏、淋巴结,研碎后加10倍生理盐水,再加双抗处理,然后室温中放置1小时,用前振荡,待重颗粒沉淀后,取上清液接种于小白鼠。选6只小白鼠,3只为1组,第1组每只腹腔接种1mL病料的上清液;第2组为对照组,腹腔注射1mL生理盐水。接种后每天进行观察,第3天第1组中有1只开始发病,1周后3只全部发病;对照组无异常变化。采发病小白鼠腹水1滴涂于载玻片上,加盖玻片镜检,视野中发现有典型的弓形虫。说明本场水貂已被弓形虫感染。
3.3 病毒的实验室检验
3.3.1 包涵体检查 取新鲜病死水貂膀胱粘膜上皮少许,生理盐水混匀涂片,自然干燥,立即进行美兰、复红染色,油镜下观察;结果发现膀胱上皮细胞胞浆中分布有大量红色的犬瘟热包涵体。
3.3.2 血清学试验 采发病7天以上幼貂的血液适量,制备血清,经56℃30分钟灭能,10倍系列稀释,分别与恒定的不少于100个鸡胚细胞的半数犬瘟热病毒混合,放入4℃的冰箱中作用24小时,各取0.1mL接种于鸡胚绒毛尿囊膜上,观察6天,结果鸡胚尿囊膜无变化,说明被检血清中有犬瘟热抗体。
3.3.3 动物实验 取典型的刚死亡不久的幼貂的肝脏、脾脏、淋巴结等病料,制成乳剂,加入双抗处理,离心20~30分钟后,取上清液备用。选断奶后15天的健康无病,没有接种犬瘟热疫苗的试验幼犬4只,皮下注射其上清液5mL,结果4只幼犬4天后全部发病,呈典型的犬瘟热症状。
通过以上检验,确认本病毒为犬瘟热病毒。
根据本次水貂临床表现、剖检变化和实验室检验,可确诊为弓形虫病和犬瘟热的混合感染。
4 综合防治措施
4.1 隔离与消毒 首先将发病水貂进行隔离,对笼舍、地面及粪便等用5%的热氢氧化钠溶液喷洒消毒,每天1次,连用2周;食槽及饮水槽,彻底清洗消毒,每天2次。对病死貂焚烧、深埋,坚决避免留做它用,加强饲养管理,所用饲料完全更换,供给新鲜、无污染、易消化的饲料,并给新鲜、清洁、无污染的饮水,避免本病的继续传播,加快本病的尽快恢复。
4.2 预防用药 肌肉注射犬瘟热抗血清1~2mL,每天1次,连用3天;同时用SMPZ治疗,30mg/kg体重,首次量加1/3;同时使用磺胺增效剂TMP,10mg/kg体重;二者混合,每日1次内服,连用5天。用药后,无新的病例出现。
4.3 治疗
4.3.1 12%复方SMPZ注射液,按50mg/kg体重肌肉注射,每天2次,连用5天。同时配合复合VB、Vc注射液各1mL混合1次肌注。经观察,症状较轻的用药3天后明显好转,很快恢复正常,对较重,特别是明显呼吸困难及神经症状的病貂,疗效不佳,仍有部分病例死亡。
4.3.2 肌肉注射犬瘟热抗血清3~5mL,每日1次,连用7~10天;同时肌肉注射病毒唑3~5mL、氟美松2~5mg,每日1次,连用7~10天。
4.3.3 加强对症治疗。发热的病貂肌注安乃近注射液;脱水严重的用5%的糖盐水、Vc等给以补液;便血者肌肉注射VK3;有神经症状的肌肉注射盐酸氯丙嗪进行镇静。
4.3.4 配合中药治疗。以清热解毒和杀虫为主,佐以补气补血,采用自组药方:黄蒿20g、知母15g、生地10g、双花15g、大青叶15g、柴胡10g、熟地10g、大枣15g、丹皮10g、炙黄芪10g、党参10g、酒当归10g、常山10g、炙甘草10g,混合水煎,供5~10只水貂内服,每天2次,连用5~7天。
经过以上综合治疗,3天开始有好转,1周左右基本恢复正常,2周后回访时除有2只幼貂出现后遗症外,其他完全康复。神经症状严重病例因医治无效而死亡。
5 小结
根据调查分析,本次疾病爆发的主要原因,作者认为,一是由于养殖户怀有侥幸心理,没有进行犬瘟热免疫预防;二是对饲料管理不善,老鼠较多,引来猫的光顾,有弓形虫卵囊的粪尿污染了饲料,从而造成感染;三是由于犬瘟热病毒的免疫抑制特点,导致一些不表现临床症状的弓形虫携带者继发感染而发病;四是由于犬瘟热病毒和弓形虫的混合感染,加重了病情,造成本病爆发流行。因此,建议养貂户,除注意平时的饲养管理外,还应加强各种疫病的预防工作,这是防止发病的主要措施。